產(chǎn)品名稱：人SV40轉(zhuǎn)染成骨細胞

英文名稱：hFOB1.19

培養(yǎng)基：hFOB1.19專用培養(yǎng)基：90%DMEM-H/F12+10%FBS+0.3mg/mlG418

形態(tài)：成骨細胞，多角形，不規(guī)則形，無空泡，背景干凈，單層貼壁生長

生長條件：培養(yǎng)溫度34℃；氣體環(huán)境5%CO2+95%空氣

生長特性：貼壁生長

儲存方式：液氮

應(yīng)用領(lǐng)域：這些細胞為研究人類正常的成骨細胞分化、成骨生理、激素、生長因子以及其他細胞因子對成骨細胞功能和分化的影響提供了一個均勻、快速增殖的模型系統(tǒng)。在 33.5°C 的允許溫度下生長的細胞表現(xiàn)出快速的細胞分裂（36 小時的倍增時間），而在 39.5°C 的限制溫度（96 小時的倍增時間）下幾乎不會發(fā)生細胞分裂。 這些細胞具有分化成表達正常成骨細胞表型的成熟成骨細胞的能力。在限制性溫度下，細胞分裂減慢，分化增加，并產(chǎn)生更成熟的成骨細胞表型。

傳代方法：

復(fù)蘇步驟：①凍存管從液氮或-80℃中取出放入PE手套中，迅速沒入37℃水浴鍋，搖晃凍存管加速溶解，以1分鐘內(nèi)全部溶解為宜；②在超凈臺中將溶解好的細胞液加入到裝有9ml犕耆嘌睦胄墓苣冢?000-1200rpm/min離心5分鐘，棄去上清液，用1-2mL*培養(yǎng)基重懸細胞。③然后將細胞懸液加入到含有5-6mL*培養(yǎng)基的T25瓶中，放入培養(yǎng)箱培養(yǎng)。 細胞傳代：①將舊培養(yǎng)液吸除，PBS清洗兩遍后，加入1-2mL胰霉（0.25%Trypsin 0.02%EDTA）；②鏡下觀察消化情況，在細胞邊緣縮小，貼壁松動時（可用吸管吸起些許胰霉輕輕吹打細胞層某處，肉眼可見細胞層脫落，即消化完成，否則繼續(xù)消化），直接吸掉胰霉，加入5-6毫升*培養(yǎng)基，輕輕吹打細胞層，把細胞層吹落，吹散。③將細胞懸液按1:2比例分到新的T25瓶中，添加適當?shù)?培養(yǎng)基，把細胞懸液打勻，于培養(yǎng)箱中培養(yǎng)。④注意培養(yǎng)基pH值變化和細胞密度，定期換液（每周2-3次），待細胞密度達到80%-90%時，重復(fù)傳代操作或者凍存。

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