血磷檢測(cè)試劑盒大量到貨,歡迎
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無(wú)機(jī)磷檢測(cè)試劑盒(鉬藍(lán)微板法) 產(chǎn)品簡(jiǎn)介: 血清中的無(wú)機(jī)磷(Inorganic phosphorous)主要由H2PO4-和HPO42-兩種根陰離子組成,上述陰離子在在丌同的pH環(huán)境下能快速相互轉(zhuǎn)換。在pH7.4血清中,二者濃度比例為1:4;在酸中毒環(huán)境下二者濃度約為1:1;在堿中毒環(huán)境下二者濃度比例為1:9;在pH4.5尿液中濃度比例為100:1。WHO推薦的常規(guī)檢測(cè)方法為比色法,我國(guó)衛(wèi)生部臨檢中心推薦的常規(guī)方法為鉬藍(lán)比色法和米吐?tīng)栥f藍(lán)比色法。
無(wú)機(jī)磷檢測(cè)試劑盒(鉬藍(lán)微板法)是先經(jīng)提純蛋白,利用無(wú)機(jī)磷不鉬酸銨結(jié)合生成磷鉬酸銨,后者被還原成藍(lán)紫色的復(fù)合物,通過(guò)酶標(biāo)儀檢測(cè)640nm處吸光度值,根據(jù)公式計(jì)算出無(wú)機(jī)磷含量。本試劑盒僅用于科研領(lǐng)域,丌宜用于診斷戒其他用途。
產(chǎn)品組成:見(jiàn)說(shuō)明書(shū)
自備材料:
1、 EP管
2、 離心機(jī)
3、 酶標(biāo)儀
操作步驟(僅供參考):
1、 (選做)制備樣品:
① 血漿、血清樣品:取0.02ml待測(cè)血漿、血清樣品,加入0.48ml Pi Assay buffer,充分混勻,室溫靜置10min,3000g離心10min,取上清,-20℃凍存,用于Pi的檢測(cè)。
② 尿液樣品:取適量的待測(cè)尿液,用50%的鹽酸調(diào)pH至6.0。用蒸餾水做1:10-1:20稀釋。取0.02ml稀釋后的尿液樣品,加入0.48ml Pi Assay buffer,充分混勻,室溫靜置10min,3000g離心10min,取上清,-20℃凍存,用于Pi的檢測(cè)。
③ 細(xì)胞戒組織樣品:取恰當(dāng)細(xì)胞戒組織進(jìn)行勻漿,低速離心取上清。取0.02ml勻漿樣品,加入0.48ml Pi Assay buffer,充分混勻,室溫靜置10min,3000g離心10min,取上清,-20℃凍存,用于Pi的檢測(cè)。
④ 高濃度樣品:如果樣品中含有較高濃度的Pi,可以使用去離子水稀釋。
⑤ (選做)樣品準(zhǔn)備完畢后可以用BCA蛋白濃度測(cè)定試劑盒測(cè)定蛋白濃度,以便于后續(xù)計(jì)算單位蛋白重量組織戒細(xì)胞內(nèi)的Pi含量。
2、 制備磷標(biāo)準(zhǔn)工作液:取適量的磷標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml),按磷標(biāo)準(zhǔn)(1mg/ml):標(biāo)準(zhǔn)品稀釋液=1:24的比例稀釋?zhuān)传@得磷標(biāo)準(zhǔn)(1.292mmol/L)。取0.02ml磷標(biāo)準(zhǔn)(1.292mmol/L),加入0.48ml Pi Assay buffer,充分混勻,室溫靜置10min,3000g離心10min,取上清,即為標(biāo)準(zhǔn)工作液,-20℃凍存,用于Pi的檢測(cè)。
3、 Pi檢測(cè):按下表操作。
4、 混勻,室溫靜置15min,酶標(biāo)儀640nm處檢測(cè),以空白管調(diào)零,讀取各管吸光度值。
計(jì)算: 血清、血漿中無(wú)機(jī)磷計(jì)算公式:磷(mmol/L)=(A測(cè)定/A標(biāo)準(zhǔn))×1.292 尿液中無(wú)機(jī)磷計(jì)算公式:磷(mmol/d)=(A測(cè)定/A標(biāo)準(zhǔn))×1.292×N×24h尿量(L) 組織中磷計(jì)算公式:磷(mmol/mg)=(A測(cè)定/A標(biāo)準(zhǔn))×1.292/待測(cè)樣品蛋白濃度(mg/L) 式中:A測(cè)定=待測(cè)管的吸光度值 A標(biāo)準(zhǔn)=標(biāo)準(zhǔn)管的吸光度值 N=尿液稀釋倍數(shù) 單位換算:mg/dl=mmol/L/0.323 參考區(qū)間:健康成年人血清磷濃度:0.96~1.62mmol/L(3~5mg/dl) 兒童血清磷濃度:1.45~2.1mmol/L(4.5~6.5mg/dl)
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注意事項(xiàng):
1、 溶血樣本對(duì)檢測(cè)有干擾,盡量避免采用溶血樣本。
2、 本法能夠用于自動(dòng)生化分析儀終點(diǎn)檢測(cè)法。
3、 如果樣品濃度過(guò)高,應(yīng)用蒸餾水稀釋后重測(cè),結(jié)果乘以稀釋倍數(shù)。
有效期: 12個(gè)月有效。
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