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補(bǔ)骨脂素是什么,補(bǔ)骨脂素的檢測
更新時間:2017-03-02   點擊次數(shù):11327次

什么是補(bǔ)骨脂素?補(bǔ)骨脂素為光敏性化合物,需輔以日光或紫外線照射。用藥后作用于受損細(xì)胞鄰近尚未*破壞或正常的黑素細(xì)胞,使酪氨酸酶活性增加,促進(jìn)黑素合成。

補(bǔ)骨脂中補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素含量測定的研究。方法采用液相色譜(HPLC)法測定,色譜柱為IntetsilODS―3柱,用甲醇-水(48∶52)為流動相,檢測波長245 m。結(jié)果平均回收率分別為98.5%,RSD為2.8%;98.8%,RSD為2.5%(n =5)。結(jié)論方法簡單、快捷、,可作為補(bǔ)骨脂質(zhì)量檢測方法之一。

補(bǔ)骨脂為豆科植物補(bǔ)骨脂(Posralea corylifolia L.)的果實,具溫腎助陽,納氣,止瀉之功效。收載于《中國藥典》2000年版1部,列于《開寶本草》,一名破故紙,謂:“補(bǔ)骨脂生嶺南諸州及波斯國。”……李時珍謂[1]:“補(bǔ)骨脂言其功也,胡人呼為婆固脂,而俗訛為破故紙也。”

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1  儀器和試藥

儀器:Agilent 1100(四元泵)液相色譜儀;UV3210紫外分光光度計;試藥:甲醇(色譜純),水為純化水,其他試劑均為分析純。補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素對照品,供含量測定用,由中檢所提供。樣品:補(bǔ)骨脂藥材購于廣東清平中藥材市場。

2  方法和結(jié)果

2.1  紫外吸收波長的研究分別取補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素對照品溶液在200~400 nm波長范圍內(nèi)作光譜掃描,結(jié)果補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素在245 nm處均有zui大吸收,故本含量測定項選擇245 nm作為檢測波長。

2.2  色譜條件色譜柱:IntesilODS-3柱(5 μm,4.6 mm×250 mm),流動相:甲醇水(48:52);流速:0.8 ml/min。檢測波長:245 nm;柱溫:25℃。補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素的tR分別為15.9,18.2 min。

2.3  線性關(guān)系考察精密稱取補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素對照品各12.5 mg,置25 ml量瓶中,加甲醇使溶解并稀釋至刻度,吸取上述對照品溶液1,2,3,4,5 ml分別置于25 ml量瓶中,加甲醇稀釋至刻度,搖勻。精密吸取上述對照品溶液10 μ1進(jìn)樣測定。以對照品進(jìn)樣量為橫坐標(biāo),峰面積積分值為縱坐標(biāo)繪制標(biāo)準(zhǔn)曲線,線性回歸方程分別為:補(bǔ)骨脂素Y=382 4X+0.8,r=0.999 7;異補(bǔ)骨脂素Y=429 2X-4.533 4,r=0.999 9;結(jié)果表明:補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素在進(jìn)樣量0.2~1 μg范圍內(nèi)時呈良好的線性關(guān)系。

2.4  對照品溶液和供試品溶液的制備

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2.4.1  對照品溶液的制備精密稱取補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素對照品適量,加甲醇制成每毫升各含50 μg的混合溶液,即得。

2.4.2  供試品溶液的制備取本品1 g研細(xì),精密稱定,置索氏提取器中,加氯fang適量,加熱提取4 h,放冷,提取液回收至干,殘渣加甲醇使溶解,置于10 ml量瓶中,甲醇少量洗滌容器,洗液并入量瓶中,加甲醇至刻度,搖勻,即得。

2.5  精密度實驗精密吸取供試品溶液10 μl,注入液相色譜儀,連續(xù)測定6次,計算補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素含量。結(jié)果表明6次測定結(jié)果的平均值分別為1.47,1.72 mg/g,RSD分別為2.5%和2.8%。

2.6  穩(wěn)定性實驗精密吸取供試品溶液10 μl,每間隔1 h測定1次,共測定5次,再過24 h測定1次,結(jié)果表明供試品溶液在24 h內(nèi)穩(wěn)定。

2.7  重復(fù)性實驗對同一批樣品6份,依法測定,平均含量分別為1.55 mg/g,RSD 2.4%;1.83 mg/g,RSD 2.6%,結(jié)果表明本法的重復(fù)性較好。

2.8  回收率實驗精密稱取已知含量補(bǔ)骨脂藥材約1 g ,精密添加補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素對照品適量,按供試品溶液制備方法制備,依法測定,計算回收率,結(jié)果平均回收率分別為97.5%,RSD為2.8%;98.8%,RSD為2.5%(n=5)。

2.9  樣品測定精密吸取供試品溶液10 μl,注入液相色譜儀,測定補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素含量,結(jié)果5批平均含量補(bǔ)骨脂素1.32 mg/g,異補(bǔ)骨脂素1.65 mg/g。

3  討論

補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素為香豆素類成分的異構(gòu)體,在《中國藥典》2000年版補(bǔ)骨脂鑒別薄層色譜條件下已能將二者分離,本實驗采用液相色譜法測定補(bǔ)骨脂中補(bǔ)骨脂素和異補(bǔ)骨脂素的含量具有方法簡單、快捷、的優(yōu)點。

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