瓊脂粉使用注意事項(xiàng)
瓊脂粉是由瓊脂糖(agarose)和瓊脂果膠(agaropectin)組成的,溶解性是瓊脂粉不溶于冷水,易溶于沸水,緩溶于熱水。檢測(cè)凝膠強(qiáng)度為1.5%瓊脂粉溶液在20攝氏度凝固后,能夠表面不破承受的大壓強(qiáng)是800-1200g/cm2 在生物學(xué)實(shí)驗(yàn)中,微生物培養(yǎng)基、植物組培培養(yǎng)基常規(guī)添加瓊脂粉的用量1.5-2% (工作濃度6-25g/L)。當(dāng)實(shí)驗(yàn)中遇到瓊脂粉不凝固時(shí),常規(guī)的檢測(cè)方法時(shí)pH值,濃度,溫度,充分混勻等情況。
說(shuō)明:培養(yǎng)基的配制,工作濃度6-25g/L
用途:微生物培養(yǎng)基、植物培養(yǎng)基原材料,一般添加量1.5-2%
瓊脂粉默認(rèn)使用PH為中性, PH小于4則無(wú)法凝結(jié),脂粉質(zhì)檢凝膠強(qiáng)度為1.5%濃度,800-1200g/cm2
常見(jiàn)問(wèn)題解答:
一,生物實(shí)驗(yàn)中遇到培養(yǎng)基加入瓊脂粉后,室溫不凝固的原因分析:
1、培養(yǎng)基PH值過(guò)低 ,偏酸,水解,瓊脂粉在PH值小于4則無(wú)法凝結(jié)。
2、所加瓊脂粉質(zhì)量不夠 ,增加用量。攪拌不均勻,倒板前沒(méi)有充分搖勻,凝固不均勻。
3、滅菌溫度過(guò)高,加熱時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。PH改變或破壞了瓊脂的凝固度
4、培養(yǎng)基沒(méi)有加熱溶解充分,就沒(méi)有凝固。
問(wèn)題1:使用瓊脂粉配置的MS培養(yǎng)基顏色明顯變黃?影響實(shí)驗(yàn)?
產(chǎn)品批次不一樣,有些批次的瓊脂粉就是顯黃色,不是質(zhì)量問(wèn)題,不影響使用。
進(jìn)口產(chǎn)品也有直接指出瓊脂粉是黃色為正?,F(xiàn)象。
問(wèn)題2:凝膠強(qiáng)度?
答:凝膠強(qiáng)度(1.5%)≥800g/cm2 800-1200g/cm2,根據(jù)不同批次會(huì)有不同數(shù)值。
1.5g瓊脂粉溶于100ml水,溶解凝固后要放置20℃恒溫箱中靜置10小時(shí)以上,再測(cè)定凝膠強(qiáng)度。與溫度,水質(zhì)等有關(guān)。
一般瓊脂粉和卡拉膠,夏季使用濃度要比冬季偏高。夏季溫度高,保存時(shí)間久,可能會(huì)有部分降解,所以要達(dá)到同樣凝膠強(qiáng)度的用量就偏高。
問(wèn)題3:瓊脂粉不凝固
1、培養(yǎng)基PH值過(guò)低 ,偏酸,水解
2、所加瓊脂量不夠 ,增加用量。攪拌不均勻,倒板前沒(méi)有充分搖勻,凝固不均勻。
3、瓊脂質(zhì)量不過(guò)關(guān),瓊脂條在使用時(shí)添加量要稍微高一點(diǎn),瓊脂粉是不是新買(mǎi)的
4、滅菌溫度過(guò)高,加熱時(shí)間過(guò)長(zhǎng)。PH改變或破壞了瓊脂的凝固度
5、培養(yǎng)基沒(méi)有加熱溶解夠不夠,就沒(méi)有凝固。是不是瓊脂加錯(cuò)了,營(yíng)養(yǎng)瓊脂不會(huì)凝固。到平板時(shí)可以推薦在超凈臺(tái)內(nèi)吹干晾干,蒸發(fā)過(guò)多水分。
瓊脂粉使用注意事項(xiàng)
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